該全自動(dòng)洗板機(jī)采用4 個(gè)運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)的機(jī)械設(shè)計(jì),能自動(dòng)選取微孔反應(yīng)板類型,并據(jù)此靈活選擇排針數(shù)B 不同的淸洗頭進(jìn)行洗板,節(jié)省淸洗液,避免清洗頭的交叉感染。水平旋轉(zhuǎn)機(jī)構(gòu)獨(dú)立進(jìn)行選板和振蕩操作,避免其長(zhǎng)期使用而影響其它運(yùn)動(dòng)軸的定位精度。該洗板機(jī)的獨(dú)特設(shè)計(jì)進(jìn)一步提卨了洗滌微孔反應(yīng)板的自動(dòng)化水平。
FAME全自動(dòng)酶免分析儀是唯一獲FDA批準(zhǔn)使用的、符合醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室要求的酶免儀,集自動(dòng)加試劑、孵育、洗板、酶標(biāo)讀板于一身,全程采用電腦控制,實(shí)現(xiàn)了操作過程的自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化,克服了手工操作的局限性和繁瑣性,從而節(jié)省了人力和時(shí)間,將工作效率大大地提高。
臨床檢驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果,每次或每天之間不可能沒有誤差。決定允許的誤差范圍,以臨床上不造成誤診與漏診為準(zhǔn),通過以下步* 來確定質(zhì)控范圍:①最佳條件下的測(cè)定誤差;②已知值的血清在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差;③未知值的血消在常規(guī)檢驗(yàn)條件下的誤差;④臨床應(yīng)用的要求。對(duì)任何一個(gè)試驗(yàn)都應(yīng)確定一個(gè)允許的誤差范圍.前提是滿足臨床要求。
設(shè)定合適的清洗次數(shù)和注液量:如洗滌不充分,殘留在微孔板上的酶標(biāo)抗體中的酶會(huì)使后加的無色底物液發(fā)生顯色反應(yīng),容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;而洗板次數(shù)過多,結(jié)合在反應(yīng)板底的酶標(biāo)化的抗原抗體復(fù)合物易被沖走,容易出現(xiàn)假陰性,使弱陽(yáng)性標(biāo)本漏檢。注液量需根據(jù)反應(yīng)孔容積設(shè)定,不超過反應(yīng)孔容積80% ,以防清洗液溢出污染相鄰反應(yīng)孔
傳統(tǒng)的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)課教學(xué),多采用以學(xué)科為中心的教學(xué)模式。這種模式對(duì)系統(tǒng)掌握課程知識(shí),培養(yǎng)學(xué)生的操作技能有著重要的作用。但是傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)課多作為理論課教學(xué)的附屬,以驗(yàn)證理論為主,其內(nèi)容多陳舊零散.缺乏對(duì)學(xué)生創(chuàng)造力的啟發(fā),學(xué)科之間的界限過于明顯,限制了學(xué)科知識(shí)的交叉融合。
洗板機(jī)的工作過程基本上是順序工作過程,軟件設(shè)計(jì)主要采用條件編碼順序控制方案,按預(yù)定的條件,逐步進(jìn)行各階段動(dòng)作步序的控制。其中,為了滿足洗扳機(jī)的一些特殊需要,還要用到可編程控制器內(nèi)部的跳轉(zhuǎn)繼電器、記憶繼電器、中間繼電器、時(shí)間繼電器和計(jì)數(shù)繼電器。
滲透壓主要取決于溶質(zhì)顆粒的數(shù)量,與其種類和大小無關(guān)。血漿滲透壓絕大部分來自所含的晶體物質(zhì),由于這些物質(zhì)分子小、顆粒數(shù)目多,故滲透壓高,稱為晶體滲透壓;而血漿蛋白部分由于分子量大、顆粒少,只產(chǎn)生滲透壓,稱為膠體滲透壓。
白衛(wèi)濱等運(yùn)用間接E L I S A方法對(duì)美國(guó)、阿根廷、巴西等國(guó)的進(jìn)口抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆,美國(guó)轉(zhuǎn)基因豆粕和中國(guó)大豆進(jìn)行了定量檢測(cè)。首先配制了一系列濃度梯度的CP4 EPSPS標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液,接著再完成待測(cè)樣品中CP4 E P S P S蛋白的提取后,運(yùn)用建立的E L I S A方法同時(shí)對(duì)二者進(jìn)行了測(cè)定,每個(gè)標(biāo)樣進(jìn)行3 次平行試驗(yàn),取其平均值。
牛初乳免疫球蛋白G 定量檢測(cè),國(guó)內(nèi)外廣泛應(yīng)用的主要有瓊脂單向免疫擴(kuò)散法(singleradial immunodiffusion,簡(jiǎn)稱SRID)和高壓液相色譜法(H P L C )。瓊脂單向免疫擴(kuò)散法又稱輻射狀免疫擴(kuò)散,其特點(diǎn)是易于在企業(yè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行操作、檢驗(yàn)。該方法測(cè)定牛初乳IgG最大的問題在于其實(shí)驗(yàn)操作特點(diǎn)導(dǎo)致無法獲得標(biāo)準(zhǔn)化的專門檢測(cè)牛初乳I g G的試劑,因此,不同研究者、檢測(cè)人員采用R …
組織胺(histamin)是由一些細(xì)菌在諸如魚、奶酪、葡萄酒等富含蛋白質(zhì)的食物中生長(zhǎng)時(shí)引起組織氨分解的產(chǎn)物。R I D A S C R E E N ® Histamin競(jìng)爭(zhēng)性E L I S A是一種改良的試劑盒,可進(jìn)行4 8次測(cè)試,測(cè)試完成的時(shí)間約需90 min。樣品的制備包含一個(gè)酰化作用,之后,在競(jìng)爭(zhēng)性E L I S A中,被酰化的組織胺會(huì)被測(cè)定。
本方法是用于所有食品中的沙門氏菌的篩選方法而不是確證試驗(yàn),因?yàn)樵囼?yàn)中所用的多克隆抗體可能與少部分的非沙門氏菌發(fā)生交叉反應(yīng)。
⑦在使用中不要讓微孔干燥,否則會(huì)伴隨著出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性、重復(fù)性不好的現(xiàn)象。洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
被動(dòng)血凝試驗(yàn)( P H A ) 用純化的HBs A g致敏醛化血細(xì)胞,測(cè)定抗- H B s。當(dāng)待測(cè)樣品中含有抗- H B s時(shí),則與血細(xì)胞上致敏的H B s A g起反應(yīng),形成肉K 可見的凝塊。由于這種試劑操作簡(jiǎn)便,無需特殊設(shè)備和儀器,
加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
世界各地原發(fā)性肝癌和肝硬變病人血淸中抗_ H C V抗體的檢出率為10.5%-80.0%,表明H C V 與肝硬變及原發(fā)性肝細(xì)胞癌的發(fā)生有關(guān)。有學(xué)者提出從輸血后肝炎到肝硬變的發(fā)病間隔期為25 ~ 3 0年,到肝癌的發(fā)生約需3 0年。
E L I S A試劑盒檢測(cè)成本低,靈敏度高,檢測(cè)限通常可達(dá)到限量要求,是一種理想的初篩方法。但由于E L I S A方法存在一定程度的假陽(yáng)性率,因此用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定的陽(yáng)性樣品必須做進(jìn)一步的確認(rèn)試驗(yàn)。
首先用霍亂腸毒素特異性抗體包被于固相載體,經(jīng)洗滌、封閉后加人待測(cè)樣品,如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合,經(jīng)保溫孵育洗滌后,即可加入酶標(biāo)記特異性抗體,再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色進(jìn)行測(cè)定,用顏色的深淺進(jìn)行抗原的定性、定量分析。
可作ELISA中載體的物質(zhì)很多,最常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保留原來的免疫活性。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。在E L I S A測(cè)定過程中,它作為載體和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)。加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。
由于比重液受溫度影響不是完全成等級(jí)相差,因此每批標(biāo)準(zhǔn)液應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白計(jì), 或氰化血紅蛋白測(cè)定法驗(yàn)證符合標(biāo)準(zhǔn)。可留置500 m l密封保存,作為以后再配制時(shí)的比 重標(biāo)準(zhǔn)。短期內(nèi)可不用血紅蛋白驗(yàn)證。
這種評(píng)價(jià)方式有一定的缺點(diǎn),即各實(shí)驗(yàn)室常對(duì)質(zhì)控物特殊對(duì)待,在檢驗(yàn)時(shí)選用特殊試劑盒,選派技術(shù)好的人員進(jìn)行檢驗(yàn),有的實(shí)驗(yàn)室互相核對(duì)結(jié)果并做修改,這就使E Q A 的結(jié)果不能反映該實(shí)驗(yàn)室日常工作水平。