A L T不同程度的增高,所以不能因A L T 升高,而診斷為肝炎,還須從多方面分析。長(zhǎng)期以來(lái)對(duì)人的A L T是否存在同工酶一直不是很淸楚,近年來(lái)北京醫(yī)院用瓊脂糖凝 膠電泳方法成功的將A L T分離出2 條區(qū)帶。在靠近加樣位點(diǎn)有一條濃重的A L T 區(qū)帶, 泳 向陽(yáng)極;另一條則為較淺的區(qū)帶,
氨芐青霉素(A m Picillin ,A M ) 屬于(3-內(nèi)酰胺類抗生素,對(duì)畜禽疾病控制和治療起著重要作用。但由于氨芐青霉素能引起過(guò)敏反應(yīng)和細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性等原因,歐美和我國(guó)等國(guó)家已相繼要求限量使用?,F(xiàn)以北京望爾生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的氨芐青霉素E L I S A 快速檢測(cè)試劑盒為例作一介紹。
美國(guó)Be a c o n脫氧雪腐鐮刀菌烯醇高靈敏度檢測(cè)試劑盒利用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附原理定量檢測(cè)谷物及谷物產(chǎn)品以及麥芽中的嘔吐毒素。
抽血時(shí), 只能外抽不能內(nèi)推,以免注人空氣, 形成氣栓, 造成嚴(yán)重后果。采血前應(yīng) 向獻(xiàn)血者耐心解釋, 消除不必要的顧慮和恐懼心理。如遇個(gè)別獻(xiàn)血者采血后發(fā)生眩暈, 可 讓其平臥休息片刻, 即可恢復(fù), 亦可針刺( 或拇指掐) 人中和合谷穴, 或吸芳香氨酊。
為了獲得化驗(yàn)結(jié)果, 標(biāo)本的收集運(yùn)送和保存是十分重要的,為了獲得可靠的化驗(yàn)結(jié) 果,應(yīng)注意有許多與標(biāo)本收集有關(guān)的因素可以影響化驗(yàn)結(jié)果。
包被:先在產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌L T 和S T 酶標(biāo)診斷試劑盒中取出包被用L T 抗體管,加人包被液0.5 m L , 混勻后全部吸出于3.6 m L 包被液中混勻,以每孔100 f iL加人到4 0孔聚苯乙烯硬反應(yīng)板中,第一孔留空作對(duì)照,于4 °C冰箱濕盒中過(guò)夜。 ② 洗板:將板中溶液甩去,用洗滌液I 洗3 次,思盡液體,翻轉(zhuǎn)反應(yīng)板,在吸水紙上拍打,去盡孔中殘留液體。
能致A L T活性增高的藥物氯丙嗪、 異煙肼、 銻劑、 奎寧、水楊酸制劑、 咲喃西林、 四環(huán)素(靜脈滴注) 、 金霉素、新生霉素、 利福平、 甲基睪丸酮、 某些避孕藥、 苯巴比妥、 利眠 寧等,以及酒精、 鉛 、 汞 、 四氯化碳、有機(jī)磷中毒、 藥物麻醉等。
洗滌在E L I S A過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗,E L I S A反應(yīng)就是靠洗滌來(lái)達(dá)到將游離和結(jié)合酶標(biāo)記物分離的目的,通過(guò)洗滌來(lái)清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。
本法只用于H R P 的交聯(lián)。該酶含1 8 % 碳水化合物,過(guò)碘酸鹽將其分子表面的多糖氧化為醛基。用硼氫化鈉(N a B H 4)中和多余的過(guò)碘酸。酶上的醛根很活潑,可與蛋白質(zhì)結(jié)合,形成按摩爾比例結(jié)合的酶標(biāo)結(jié)合物。有人認(rèn)為此法為辣根過(guò)氧化酶交聯(lián)最有效的方法。但也有人認(rèn)為由于所用試劑較為劇烈,各批實(shí)驗(yàn)結(jié)果不易重復(fù)。
試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)E L I S A方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物恩諾沙星和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗恩諾沙星抗體,加入酶標(biāo)二抗后,用T M B 底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物恩諾沙星的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即可得出相應(yīng)殘留物恩諾沙星的含量。
作為一種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑,德國(guó)拜發(fā)R - B i o p h a r m公司生產(chǎn)的R I D A S C R E E N ® R o tavirus輪狀病毒檢測(cè)試劑盒主要針對(duì)糞便樣本,操作簡(jiǎn)便且靈敏度高,可以更早地并且可靠地檢測(cè)出輪狀病毒抗原,可以在短時(shí)間內(nèi)處理大量的標(biāo)本。
自身免疫反應(yīng)所引起的病損窗H B V感染肝細(xì)胞后,細(xì)胞膜上除有病毒特異性抗原外,還會(huì)引起肝細(xì)胞表面自身抗原發(fā)生改變。暴JS出肝特異性脂蛋白抗原(LSP),可作為自身抗原誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生對(duì)肝細(xì)胞的自身免疫反應(yīng)。通過(guò)C T L的殺傷作用或釋放淋巴因子的直接或間接作用,損害肝細(xì)胞。
此處以德國(guó)拜發(fā)R-B i o p ha r m公司生產(chǎn)的R I D A S C R E E N ® Sulfamethazin磺胺二甲嘧啶E L I S A檢測(cè)試劑盒為例作一介紹。R I D A S C R E E N ® Sulfamethazin磺胺二甲嘧啶檢測(cè)試劑盒,采用競(jìng)爭(zhēng)性酶聯(lián)免疫反應(yīng),用于定量檢測(cè)奶類、肉類和腎臟中磺胺二甲嘧啶以及定性檢測(cè)肉類和腎臟中磺胺二甲嘧啶含…
金黃色葡萄球菌腸毒素是金黃色葡萄球菌的一種外毒素,為水溶性的蛋白質(zhì),是引起食物中毒的致病因子,占細(xì)菌性食物中毒的第二位。根據(jù)血清型的不同,可將金黃色葡萄球菌的腸毒素分為S E A J E B ' S E C ! 、S E C 2、S E C 3、S E D 和S E E 7 種類型,也有報(bào)道稱有8 個(gè)血清型的,增加了 S E F 新血清型。其中,以S E A 引起的食物中毒最多見(jiàn)
板之間重復(fù)性差在不同酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行一相同標(biāo)本或質(zhì)控的重復(fù)實(shí)驗(yàn),其結(jié)果的偏差超過(guò)預(yù)期范圍,常見(jiàn)原因有:每次孵育時(shí)溫度有差異;使用陳舊配制的試劑,或新鮮配制試劑與陳舊試劑混合在一起使用;實(shí)驗(yàn)步驟差異;加樣技術(shù)差異;加樣順序差異;混勻技術(shù)差異;孵育程序差異;試劑混合差異;板-板實(shí)驗(yàn)所使用的試劑的儲(chǔ)存條件差異。
德國(guó)R-Biopharm R I D A S C R E E N F A S T Fumonisin采用競(jìng)爭(zhēng)性的酶免疫分析法定量分析谷物及飼料中的伏馬菌毒素,該試劑盒已經(jīng)經(jīng)過(guò)美國(guó)U S D A / G I P S A 認(rèn)證。
⑧洗滌時(shí)沖擊力過(guò)大,洗滌液浸泡時(shí)間太長(zhǎng),洗滌次數(shù)增加,導(dǎo)致已形成的抗原、抗體復(fù)合物洗脫。⑨底物反應(yīng)的溫度不夠,時(shí)間不足。
有些細(xì)胞株還可持續(xù)地產(chǎn)生Dane顆粒,這些細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)主要用于過(guò)篩抗- H B V 藥物。用S 基因傳染一些細(xì)胞系(如中國(guó)地鼠卵細(xì)胞、C H O 細(xì)胞系),可以分泌HB s A g而不含其他病毒蛋白,已用于制備疫苗。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用批準(zhǔn)后,應(yīng)根據(jù)申請(qǐng)的動(dòng)物仲域和數(shù)獄,安排實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)和使用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須在指定的區(qū)域內(nèi)飼養(yǎng)和使用,禁止在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)動(dòng)物. 實(shí)驗(yàn)操作結(jié)電時(shí),應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物施行安樂(lè)死術(shù)。
參考文獻(xiàn)通常凡引述的資料和主要的論點(diǎn)都應(yīng)注明文獻(xiàn)出處,以便使讀者檢索查閱。所引文獻(xiàn)應(yīng)以近3年內(nèi)者為主;另外,未公開(kāi)發(fā)表的資料不宜作為參考文獻(xiàn)。在我國(guó)許多期刊希望列出重要的參考文獻(xiàn),一般限20~30條為宜;但國(guó)際上許多生物醫(yī)學(xué)期刊的綜述文章,其參考文獻(xiàn)甚多,全篇所列文獻(xiàn)常達(dá)數(shù)百條之多。